Kluczowe pojęcia
- aktywność: Miara synergizmu siły indywidualnych oddziaływań między białkami.
- erytrocyty: Czerwone krwinki.
- aglutynacja: zlepianie się czerwonych krwinek lub bakterii, zwykle w odpowiedzi na określone przeciwciało
Aglutynacja jest widocznym wyrazem agregacji antygenów i przeciwciał. Reakcje aglutynacji odnoszą się do cząstek antygenów testowych, które zostały sprzężone z nośnikiem. Nośnik może być sztuczny (taki jak lateks lub cząsteczki węgla drzewnego) lub biologiczny (taki jak czerwone krwinki). Te skoniugowane cząsteczki wchodzą w reakcję z surowicą pacjenta, która prawdopodobnie zawiera przeciwciała. Punktem końcowym testu jest obserwacja grudek powstałych w wyniku tworzenia się kompleksu antygen-przeciwciało. Jakość wyniku jest określana przez czas inkubacji ze źródłem przeciwciał, ilość i awidność antygenu sprzężonego z nośnikiem oraz warunki środowiska testowego (np. pH i stężenie białka). W immunologii diagnostycznej stosuje się różne metody aglutynacji, w tym aglutynację lateksową, testy flokulacyjne, bezpośrednią aglutynację bakteryjną i hemaglutynację.
W aglutynacji lateksowej wiele cząsteczek przeciwciał jest związanych z kulkami lateksowymi (cząsteczkami), co zwiększa liczbę miejsc wiążących antygen. Jeśli antygen jest obecny w badanej próbce, zwiąże się z przeciwciałem i utworzy widoczne, usieciowane agregaty. Aglutynacja lateksowa może być również wykonywana z antygenem sprzężonym z kulkami w celu zbadania obecności przeciwciał w próbce surowicy.
Testy flokulacyjne są przeznaczone do wykrywania przeciwciał i opierają się na interakcji rozpuszczalnych antygenów z przeciwciałami, wytwarzając osad drobnych cząstek, które można zobaczyć gołym okiem.
Bezpośrednia aglutynacja bakteryjna wykorzystuje całe patogeny jako źródło antygenu. Mierzy ona poziom przeciwciał wytwarzanych przez gospodarza zakażonego tym patogenem. Wiązanie przeciwciał z antygenami powierzchniowymi bakterii powoduje powstanie widocznych grudek.
Hemaglutynacja wykorzystuje erytrocyty jako biologiczne nośniki antygenów bakteryjnych oraz oczyszczone polisacharydy lub białka do określenia obecności odpowiednich przeciwciał w próbce.
Testy aglutynacji są łatwe do wykonania i w niektórych przypadkach są najbardziej czułymi testami dostępnymi obecnie. Testy te mają szeroki zakres zastosowań w diagnostyce klinicznej nieinfekcyjnych zaburzeń immunologicznych i chorób zakaźnych.