Neste desenho do artista francês Jacques le Moyne de Morgues, Timucua foge dos colonos espanhóis, que chegam de navio. Le Moyne viveu em Fort Caroline, o posto avançado francês, antes dos espanhóis destruírem a colónia em 1562.
Espanha ganhou um lugar na Florida actual, vendo essa área e as terras a norte como uma extensão lógica do seu império das Caraíbas. Em 1513, Juan Ponce de León tinha reivindicado a área à volta da actual St. Augustine para a coroa espanhola, nomeando a terra Pascua Florida (Festa das Flores, ou Páscoa) para o dia de festa mais próximo. Ponce de León não conseguiu estabelecer ali um povoado permanente, mas em 1565, a Espanha precisava de um posto avançado para enfrentar os corsários franceses e ingleses, utilizando a Florida como base para atacar navios espanhóis carregados de tesouros que se dirigiam de Cuba para Espanha. A ameaça aos interesses espanhóis tomou um novo rumo em 1562, quando um grupo de protestantes franceses (Huguenots) estabeleceu uma pequena povoação a que chamaram Fort Caroline, a norte de Santo Agostinho. Com a autorização do Rei Filipe II, o nobre espanhol Pedro Menéndez liderou um ataque ao Forte Carolina, matando a maioria dos colonos e destruindo o forte. A eliminação do Forte Carolina serviu dois objectivos para os espanhóis – ajudou a reduzir o perigo dos corsários franceses e erradicou a ameaça francesa à reivindicação da Espanha para a área. O concurso sobre a Florida ilustra como as rivalidades europeias se espalharam pelas Américas, especialmente o conflito religioso entre católicos e protestantes.
Em 1565, o vitorioso Menéndez fundou Santo Agostinho, agora a mais antiga povoação europeia das Américas. No processo, os espanhóis deslocaram os índios Timucua locais da sua antiga cidade de Seloy, que se manteve durante milhares de anos. Os Timucua sofreram muito com doenças introduzidas pelos espanhóis, diminuindo de uma população de cerca de 200.000 habitantes pré-contactos para cinquenta mil em 1590. Em 1700, restava apenas um mil Timucua. Tal como em outras áreas de conquista espanhola, os padres católicos trabalharam para conseguir uma conquista espiritual, obrigando os Timucua sobreviventes, desmoralizados e cambaleando de perdas catastróficas de família e comunidade, a converterem-se ao catolicismo.
p>A Flórida Espanhola fez um alvo convidativo para os rivais imperiais espanhóis, especialmente os ingleses, que queriam ter acesso às Caraíbas. Em 1586, os colonos espanhóis em Santo Agostinho descobriram a sua vulnerabilidade ao ataque quando o pirata inglês Sir Francis Drake destruiu a cidade com uma frota de vinte navios e cem homens. Durante as décadas seguintes, os espanhóis construíram mais fortes de madeira, todos eles queimados por ataques aos rivais europeus. Entre 1672 e 1695, os Espanhóis construíram um forte de pedra, Castillo de San Marcos, para melhor defenderem Santo Agostinho contra os desafiantes.div>Vasculhe os recursos multimédia do Serviço de Parque Nacional em Castillo de San Marcos para ver como o forte e os portões têm sido ao longo da história.