Estudo da interacção do carprofeno e os seus enantiómeros com a albumina de soro humano–I. Mecanismo de ligação estudado por diálise e métodos espectroscópicos

A ligação do carprofeno, um medicamento anti-inflamatório não esteróide da classe do ácido arilo propiónico, e os seus enantiómeros à albumina de soro humano (HSA) foi estudada por diálise e métodos espectroscópicos. Os parâmetros de ligação obtidos por diferentes métodos foram objecto de um estreito acordo. A ligação do carprofeno à HSA tanto por fluorescência como pelos métodos de diálise de equilíbrio (ED) é caracterizada por dois conjuntos de constantes de associação . O S(+)-enantiómero de carprofeno mostrou uma afinidade ligeiramente maior para a HSA do que o seu correspondente antípoda por ambos os métodos. Diferentes análises da ligação à HSA sugeriram a presença de um local de alta afinidade e cinco a sete locais de baixa afinidade para o carprofeno e os seus enantiómeros na HSA. Os dados de deslocamento de fluorescência implicaram que o carprofeno se liga principalmente ao sítio II, o sítio benzodiazepínico, enquanto que o sítio de baixa afinidade do carprofeno é o sítio I, o sítio warfarin. Dados circulares de dicrómio sugerem diferentes mecanismos para a alta afinidade e a baixa ligação do carprofeno ao HSA. Os dados são consistentes, sendo a maior parte da energia de ligação no local II interacções electrostáticas e hidrofóbicas, enquanto que para a ligação de baixa afinidade, as interacções hidrofóbicas. A ligação foi exotérmica, induzida pela entropia e espontânea, como indicado pelas análises termodinâmicas. A partir de dados de ligação com derivados de HSA quimicamente modificados, é provável que os resíduos de tirosina, lisina e histidina estejam especialmente envolvidos na ligação do carprofeno à HSA, e é muito provável que a ligação de alta afinidade do carprofeno esteja localizada na parte terminal N do domínio III ou naquela secção de proteína mais a parte terminal C do domínio II da molécula de HSA. Quando a ligação do carprofeno ao HSA foi comparada à ligação do éster metílico do carprofeno ao HSA (K = 0,1 x 10(6) M-1), verificou-se que o grupo carboxilo do carprofeno desempenhava um papel importante, especialmente na ligação de alta afinidade do carprofeno ao HSA. A alta afinidade do carprofeno com HSA era independente das alterações conformacionais na HSA causadas pela transição N-B.