Studie van de interactie van carprofen en zijn enantiomeren met humaan serumalbumine–I. Mechanism of binding studied by dialysis and spectroscopic methods

De binding van carprofen, een niet-steroïdaal anti-inflammatoir geneesmiddel van de aryl propionzuur klasse , en zijn enantiomeren aan humaan serum albumine (HSA) is bestudeerd door dialyse en spectroscopische methoden. De bindingsparameters die met de verschillende methoden werden verkregen, kwamen goed overeen. De binding van carprofen aan HSA door zowel fluorescentie- als evenwichtsdialyse (ED) methoden wordt gekarakteriseerd door twee sets van associatieconstanten . Het S(+)-enantiomeer van carprofen vertoonde met beide methoden een iets hogere affiniteit voor HSA dan zijn overeenkomstige antipode. Verschillende analyses van de binding aan HSA suggereerden de aanwezigheid van één hoge affiniteitsplaats en vijf tot zeven lage affiniteitsplaatsen voor carprofen en zijn enantiomeren op HSA. Fluorescentie-verplaatsingsgegevens impliceerden dat carprofen voornamelijk bindt aan locatie II, de benzodiazepineplaats, terwijl de lage affiniteit van carprofen locatie I is, de warfarine-locatie. Circulair dichroïsme suggereerde verschillende mechanismen voor de hoge affiniteit en de lage affiniteit van carprofen met HSA. De gegevens zijn consistent met het feit dat het grootste deel van de bindingsenergie op vindplaats II bestaat uit elektrostatische en hydrofobe interacties, terwijl voor de lage affiniteitsbinding hydrofobe interacties verantwoordelijk zijn. De binding was exotherm, entropie-gestuurd en spontaan, zoals blijkt uit de thermodynamische analyses. Uit de bindingsgegevens met chemisch gemodificeerde HSA-derivaten is het waarschijnlijk dat vooral tyrosine-, lysine- en histidineresiduen betrokken zijn bij de binding van carprofen aan HSA, en het is het meest waarschijnlijk dat de hoge affiniteitsbinding van carprofen zich bevindt in het N-terminale deel van domein III of dat deel van het eiwit plus het C-terminale deel van domein II van het HSA-molecuul. Toen de binding van carprofen aan HSA werd vergeleken met de binding van carprofen methylester aan HSA (K = 0.1 x 10(6) M-1), bleek de carboxylgroep van carprofen vooral een belangrijke rol te spelen bij de hoge affiniteitsbinding van carprofen aan HSA. De hoge affiniteit van carprofen aan HSA was onafhankelijk van de conformatieveranderingen aan HSA veroorzaakt door de N-B overgang.