Étude de l’interaction du carprofène et de ses énantiomères avec l’albumine sérique humaine–I. Mécanisme de liaison étudié par dialyse et méthodes spectroscopiques

La liaison du carprofène, un anti-inflammatoire non stéroïdien de la classe des acides arylpropioniques , et de ses énantiomères à l’albumine sérique humaine (HSA) a été étudiée par dialyse et méthodes spectroscopiques. Les paramètres de liaison obtenus par les différentes méthodes étaient en étroite concordance. La liaison du carprofène à l’HSA par les méthodes de fluorescence et de dialyse à l’équilibre (DE) est caractérisée par deux séries de constantes d’association. L’énantiomère S(+) du carprofène a montré une affinité légèrement plus élevée pour HSA que son antipode correspondant par les deux méthodes. Différentes analyses de la liaison à HSA ont suggéré la présence d’un site de haute affinité et de cinq à sept sites de faible affinité pour le carprofène et ses énantiomères sur HSA. Les données de déplacement de fluorescence impliquent que le carprofène se lie principalement au site II, le site des benzodiazépines, tandis que le site de faible affinité du carprofène est le site I, le site de la warfarine. Les données de dichroïsme circulaire suggèrent des mécanismes différents pour la liaison de haute affinité et de faible affinité du carprofène à l’HSA. Les données sont cohérentes avec le fait que la majeure partie de l’énergie de liaison au site II est constituée d’interactions électrostatiques et hydrophobes, alors que pour la liaison de faible affinité, ce sont des interactions hydrophobes. La liaison était exothermique, entropique et spontanée, comme l’indiquent les analyses thermodynamiques. D’après les données de liaison avec des dérivés de HSA chimiquement modifiés, il est probable que les résidus tyrosine, lysine et histidine soient particulièrement impliqués dans la liaison du carprofène à HSA, et il est plus probable que la liaison de haute affinité du carprofène soit située dans la partie N-terminale du domaine III ou cette section de la protéine plus la partie C-terminale du domaine II de la molécule de HSA. Lorsque la liaison du carprofène à l’HSA a été comparée à la liaison de l’ester méthylique de carprofène à l’HSA (K = 0,1 x 10(6) M-1), on a constaté que le groupe carboxyle du carprofène jouait un rôle important, notamment dans la liaison à haute affinité du carprofène à l’HSA. La haute affinité du carprofène à HSA était indépendante des changements conformationnels sur HSA causés par la transition N-B.