Bevor Sie mit dem Bau Ihrer Objektträger beginnen, stellen Sie sicher, dass Sie alles haben, was Sie benötigen, einschließlich Objektträger, Deckgläser, Pipetten und alle Chemikalien oder Färbemittel, die Sie verwenden möchten.
Sie werden zwei Haupttypen von Objektträgern verwenden, 1) den gewöhnlichen flachen Glasobjektträger und 2) die Vertiefung oder Well-Objektträger. Objektträger mit Vertiefungen haben eine kleine Vertiefung in der Mitte, die einen Tropfen Wasser oder eine flüssige Substanz aufnehmen kann. Sie sind teurer und werden in der Regel ohne Deckglas verwendet.
Standard-Objektträger können entweder aus Kunststoff oder Glas sein und sind 25 x 75 mm groß und 1 bis 1,2 mm dick.
Nass-Objektträger verwenden ein Deckglas, ein sehr dünnes quadratisches Stück Glas (oder Kunststoff), das über den Probentropfen gelegt wird. Ohne das Deckglas würde sich der Tropfen aufgrund der Oberflächenspannung zu einer Kuppel zusammenballen. Die Abdeckung bricht diese Spannung, macht die Probe flach und ermöglicht eine sehr genaue Untersuchung mit minimaler Fokussierung. Die Abdeckung dient auch dazu, das Objektiv vor einer Beeinträchtigung des Probentropfens zu schützen.
MONTAGE
Es gibt vier übliche Arten, einen Objektträger zu montieren, die im Folgenden beschrieben werden:
Trockenmontage
Bei der Trockenmontage wird die Probe direkt auf den Objektträger gelegt. Ein Deckglas kann verwendet werden, um das Präparat an seinem Platz zu halten und das Objektiv zu schützen. Trockenmontagen eignen sich für Proben wie Pollen, Haare, Federn oder pflanzliche Materialien.
Nassmontagen
Bei Nassmontagen wird ein Tropfen Wasser verwendet, um die Probe zwischen Objektträger und Deckglas aufzuhängen. Legen Sie eine Probe auf den Objektträger. Geben Sie mit einer Pipette einen Tropfen Wasser auf die Probe. Legen Sie dann eine Kante des Deckblatts über die Probe und senken Sie das Deckblatt vorsichtig mit einem Zahnstocher oder ähnlichem ab. Diese Methode verhindert, dass Luftblasen unter dem Deckglas eingeschlossen werden.
Ihr Ziel ist es, genügend Wasser zu haben, um den Raum zwischen Deckglas und Objektträger zu füllen. Wenn zu viel Wasser vorhanden ist, rutscht der Objektträger herum. Nehmen Sie ein Stück Papierhandtuch und halten Sie es dicht an eine Kante des Deckglases. Dadurch wird etwas Wasser herausgesaugt. Wenn es zu trocken ist, geben Sie einen Tropfen Wasser neben das Deckblatt. Üben Sie dies, bis Sie sich daran gewöhnt haben.
Nasspräparate eignen sich zur Untersuchung von wassergebundenen Organismen wie Pantoffeltierchen oder Körperflüssigkeiten wie Speichel, Blut und Urin.
Schnittpräparat
Bei einem Schnittpräparat wird ein extrem dünner Querschnitt eines Präparats verwendet. Schneiden Sie mit einem Mikrotom eine dünne Scheibe der ausgewählten Probe, z. B. eine Zwiebel, und legen Sie diese vorsichtig auf den Objektträger. Befolgen Sie dann die Anweisungen für eine Trocken- oder Nassmontage. Eine Färbung kann oft direkt auf die Probe aufgetragen werden, bevor sie mit einem Deckglas abgedeckt wird.
Schnittpräparate eignen sich für eine Vielzahl von Proben, wie z. B. Obst, Gemüse und andere Feststoffe, die in kleine Scheiben geschnitten werden können.
Ausstrich
Ein Ausstrich wird gemacht, indem eine dünne Schicht der Probe vorsichtig über einen Objektträger gestrichen und dann ein Deckglas aufgetragen wird. Normalerweise sollte man einen Ausstrich an der Luft trocknen lassen, bevor man eine Färbung aufträgt.
FARBEN
Färbungen werden verwendet, um verschiedene Zelltypen mit Hilfe von Lichtmikroskopen zu identifizieren. Sie verleihen dem Bild mehr Kontrast und ermöglichen die Klassifizierung von Zellen nach ihrer Form (Morphologie). Durch die Verwendung verschiedener Färbungen können Sie selektiv verschiedene Bereiche wie die Zellwand, den Zellkern oder die gesamte Zelle färben. Färbungen können auch helfen, zwischen lebenden und toten Zellen zu unterscheiden.
Farbstoffe werden je nach ihrer chemischen Zusammensetzung in neutrale, saure oder basische Gruppen eingeteilt und ziehen dementsprechend verschiedene Organismen an oder stoßen sie ab. Zum Beispiel verwenden Wissenschaftler und Mediziner Methylenblau, eine leicht alkalische Färbung, um das Vorhandensein von Desoxyribonukleinsäure, besser bekannt als DNA, zu erkennen.
Farbstofftypen
Jod ist einer der gebräuchlichsten Farbstoffe und wird zum Nachweis von Stärke in einer Vielzahl von Proben verwendet. Es färbt Kohlenhydrate in Pflanzen und tierischen Proben braun oder blauschwarz. Glykogen erscheint rot.
Methylenblau ist eine alkalische Färbung, die zur Identifizierung von sauren Zellkernen und DNA in Tier-, Bakterien- oder Blutproben nützlich ist. Es ist auch in Aquarien nützlich, um die Ausbreitung von Pilzinfektionen bei Fischen zu verhindern. Siehe weitere Details >
Eosin Y ist eine saure Färbung, die für alkalische Zellen (z.B. Zytoplasma) rosa färbt. Es färbt rot für Blutzellen, Zytoplasma und Zellmembranen. Die wichtigsten medizinischen Anwendungen von Eosin liegen in der Blut- und Knochenmarkuntersuchung, einschließlich des PAP-Abstrichs. See more details >
Gram’s Stain ist eines der am häufigsten verwendeten Verfahren zur Identifizierung von Bakterien – täglich in Krankenhäusern eingesetzt. Es ist ein Primärtest, der schnell und kostengünstig Bakterien in einen von zwei Typen einteilt: Gram positiv oder Gram negativ. Siehe weitere Details >
SCHRITTE
- Bereiten Sie einen Objektträger für die Nasspräparation vor.
- Fangen Sie einen Tropfen Färbemittel mit einer Pipette oder einem Augentropfer auf.
- Tragen Sie einen Tropfen Färbemittel auf eine Außenkante Ihres Objektträgers auf.
- Legen Sie ein Stück Serviette oder Papiertuch auf die gegenüberliegende Seite Ihres Objektträgers, direkt an den Rand. Dadurch wird die Färbung unter das Deckblatt und über das Präparat gezogen.
- Sie müssen eventuell einen weiteren Tropfen hinzufügen, um eine vollständige Abdeckung zu gewährleisten.
- Der Objektträger ist jetzt bereit zum Betrachten.